INS-1 大鼠胰島素細胞

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更新時間：2024-11-14
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INS-1 大鼠胰島素細胞
Complete growth medium:RPMI1640+0.11g/L L-Glutamine +0.11g/L 丙酮酸鈉+5.6 MMOL/L 葡萄糖+ 1ml/L 2 –mercaptoethanol + 10%FBS

Temperature: 37.0℃

Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide （CO₂）, 5%

傳代方法：

收到細胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。

（一）如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。

（二）如果細胞已長滿，即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。1:3~1:6傳代；2~3天1次。　

。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細胞不適應而造

成生長不好。

凍存方法：凍存液：基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

儲存：液氮儲存

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